Как выглядит хорошая плазма крови

Из чего состоит плазма крови и для чего она нужна в медицине

Другие белки

Кроме вышеперечисленных, в плазме содержатся и другие белки:

Также можете почитать: Общий белок в крови

Функции плазмы

Плазма крови выполняет много функций, среди которых:

Донорская плазма спасает много человеческих жизней

Как получить плазму?

Получение плазмы из крови происходит с помощью центрифугирования. Метод позволяет отделить плазму от клеточных элементов с помощью специального аппарата, не повреждая их. Кровяные тельца возвращаются донору.

Процедура по сдаче плазмы имеет ряд преимуществ перед простой сдачей крови:

Существуют ограничения по сдаче плазмы. Так, донор может сдать плазму не более 12 раз за год.

Сдача плазмы занимает не больше 40 минут.

Плазма является источником такого важного материала, как сыворотка крови. Сыворотка – это та же плазма, но без фибриногена, однако с тем же набором антител. Именно они борются с возбудителями различных заболеваний. Иммуноглобулины способствуют скорейшему развитию пассивного иммунитета.

Чтобы получить сыворотку крови, стерильную кровь помещают в термостат на 1 час. Далее полученный сгусток крови отслаивают от стенок пробирки и определяют в холодильник на 24 часа. Полученную жидкость при помощи пастеровской пипетки добавляют в стерильный сосуд.

Какой процент от объема плазмы составляет белок?

Это самый многочисленный компонент плазмы, он занимает 8 % всей плазмы. Плазма содержит белок различных фракций.

Основные из них:

Глобулины

Остальные белки плазмы относятся к глобулинам, которые являются крупномолекулярными. Вырабатываются они в печени и в органах иммунной системы. Основные виды:

Альфа-глобулины связывают билирубин и тироксин, активизируют производство белков, транспортируют гормоны, липиды, витамины, микроэлементы.

Бета-глобулины связывают холестерол, железо, витамины, транспортируют стероидные гормоны, фосфолипиды, стерины, катионы цинка, железа.

Гамма-глобулины связывают гистамин и участвуют в иммунологических реакциях, поэтому их называют антителами, или иммуноглобулинами. Существует пять классов иммуноглобулинов: IgG, IgM, IgA, IgD, IgE. Вырабатываются в селезенке, печени, лимфоузлах, костном мозге. Они отличаются друг от друга биологическими свойствами, структурой. Имеют разные способности по связыванию антигенов, активированию иммунных белков, имеют разную авидность (скорость связывания с антигеном и прочность) и способность проходить через плаценту. Примерно 80% всех иммуноглобулинов оставляют IgG, которые обладают высокой авидностью и являются единственными из всех, способными проникать через плаценту. Первыми у плода синтезируются IgM. Они же появляются первыми в сыворотке крови после большинства прививок. Обладают высокой авидностью.

Состав крови

Источник

Как выглядит хорошая плазма крови

Люди, которые переболели и вылечились от COVID-19, могут помочь в борьбе с пандемией так, как не могут многие другие: сдать плазму крови.

Что такое донорство плазмы, почему это важно, и кто может стать донором?

Что такое плазма крови

Плазма — это жидкая часть крови, она переносит клетки крови и белки по всему телу. 55% крови состоит из плазмы; остальные 45% — это форменные элементы: эритроциты, лейкоциты и тромбоциты.

У плазмы четыре основные функции:

Поддержание кровяного давления и объёма циркулирующей крови.

Участие в свёртывании крови и иммунных процессах.

Снабжение тканей электролитами (Na, K), поддержание pH баланса.

Кому нужна плазма

Обычно плазму переливают пациентам с травмами, обширными ожогами, тем, кто страдает тяжёлыми заболеваниями печени, иммунодефицитом или нарушениями свёртываемости крови. Детям и взрослым, страдающим лейкемией и другими видами рака, перенёсшим трансплантацию костного мозга, тоже может потребоваться переливание плазмы.

Как плазма помогает при COVID-19

После заражения COVID-19, в организме начинают вырабатываться антитела для борьбы с вирусом. Но, происходит это не сразу, а занимает от 7 до 14 дней. Выздоровление наступит только после того, как сформируется иммунный ответ к инфекции. После перенесённой болезни, в крови остаются специфические антитела.

Когда болезнь протекает тяжело, и самочувствие только ухудшается, вероятно, антител вырабатывается недостаточно. Логика подсказывает, что, если бы антител было побольше, то и выздоровление наступило быстрее. Но где их взять? Нет таблетки с дополнительными антителами. Но можно перелить больному человеку плазму уже переболевшего и выздоровевшего от COVID-19, и содержащиеся в ней антитела сразу приступят к борьбе с вирусами.

Кто может стать донором

Сдать плазму может каждый, если соответствует следующим требованиям:

Возраст от 18 до 55 лет

Есть подтверждение перенесённой инфекции COVID-19 в лёгкой или среднетяжёлой форме. Это может быть выписка из больницы или поликлиники, результаты КТ или лабораторных исследований.

Нет противопоказаний к донорству.

На момент сдачи плазмы- хорошее самочувствие.

В любом случае, окончательное решение о допуске к донорству может принять только врач-трансфузиолог.

Как проходит процедура

Во время сдачи плазмы донор сидит в удобном донорском кресле. Сам процесс занимает примерно 40 минут.

Кровь берётся из руки и проходит через специальный аппарат, который собирает плазму, а затем возвращает эритроциты и тромбоциты обратно донору. Процедура совершенно безопасна, после неё возможно лёгкое обезвоживание и усталость, в месте укола может появиться синяк.

Сразу после сдачи плазмы можно отправляться домой. Один день после процедуры лучше не заниматься спортом, не курить, воздержаться от алкоголя, пить побольше жидкости.

Если вы перенесли COVID-19, сдача плазмы — это то, что действительно может помочь тем, кто прямо сейчас борется с инфекцией.

Источник

Переливание плазмы крови: насколько эффективно при коронавирусе?

16 апреля 2020 года Городская больница №40 Курортного района начала принимать больных с новой коронавирусной инфекцией. Для этих целей перепрофилировали терапевтический корпус на 130 коек, к 100 из них подвели кислород и аппараты ИВЛ. Учитывая высокий уровень оснащения медучреждения, в стационар Сестрорецка стали доставлять самых тяжелых больных.

По мере получения информации о вирусе медики непрерывно разрабатывали методы лечения опасной инфекции. Для всех пациентов, поступающих в стационар с положительным тестом на КОВИД, стала доступна комплексная терапия, включающая использование интерлейкиновых препаратов, влияющих на воспалительный ответ, а также противовирусных средств и методов гравитационной хирургии. Однако настоящим прорывом в лечении коронавирусных больных стало переливание плазмы крови от людей, которые выздоровели.

Переливание плазмы

Способ лечения, при котором больному вводится плазма крови, взятая у переболевшего аналогичным вирусом человека, начали исследовать еще два века назад. В начале эффективность такой терапии проверяли на животных. В 1916 году этот способ впервые опробовали на человеке – 26 больным острым полиомиелитом дали сыворотку крови выздоровевших. С тех пор переливание плазмы стали использовать для лечения и профилактики многих инфекций.

Когда на фармацевтическом рынке появились антибиотики и вакцины, введение плазмы отошло на второй план. Однако в начале XXI века медикам вновь пришлось вспомнить об этом методе. Переливание плазмы успешно применялось при лечении эпидемии атипичной пневмонии, пандемического гриппа H1N1 и вспышек вируса Эбола. Сегодня таким образом лечат коронавирусных больных во многих странах мира.

Лечение плазмой крови

Заведующий отделением реанимации и интенсивной терапии Городской больницы №40 Дмитрий Ильин стал первым в Петербурге пациентом, которому перелили плазму крови от донора, переболевшего КОВИД. Изначально заболевание протекало в легкой форме, однако постепенно состояние врача ухудшилось, несмотря на то, что он принимал все необходимые препараты.

1 мая объем поражения легочной ткани был до 20%, это легкая степень по КТ. В дальнейшем через 5 дней на фоне выраженной интоксикации, количество поражения легочной ткани было уже больше 50.

Дмитрий Ильин, врач-анестезиолог-реаниматолог, заведующий отделением реанимации и интенсивной терапии СПБ ГБУЗ «Городская больница №40»

Когда болезнь стала представлять серьезную угрозу для жизни, Дмитрия Ильина госпитализировали в отделение реанимации инфекционного корпуса №3 40-й больницы. Перед тем, как перевести врача на аппарат искусственной вентиляции легких, на нем решили испробовать плазму.

Все очень переживали и надеялись, что данная методика, которая использовалась впервые, поможет мне выйти из этого состояния. После переливания плазмы, переливалась дважды плазма, состояние значительно улучшилось, интоксикация снизилась, ушла температура, наладилась сатурация. Дыхательная недостаточность стала постепенно улучшаться.

Дмитрий Ильин, врач-анестезиолог-реаниматолог, заведующий отделением реанимации и интенсивной терапии СПБ ГБУЗ «Городская больница №40»

Восстановление Дмитрия заняло чуть больше двух месяцев. После реанимации была реабилитация, затем его отправили на амбулаторное лечение. Сегодня заведующий отделением полностью оправился после тяжелой болезни и вернулся к работе.

Еще одним пациентом, которому помогла плазма переболевших коронавирусом людей, также стал врач Городской больницы №40. Заведующий отделением реабилитации спинальных больных и черепно-мозговой травмы Анатолий Спирин рассказал о симптомах заболевания и лечении.

Был сильный кашель и насморк, болела голова. Я не могу сказать, что это что-то удивительное, но все-таки было чем-то навязчивым.

Анатолий Спирин, заведующий отделением реабилитации спинальных больных и черепно-мозговой травмы СПб ГБУЗ «Городская больница №40»

Ухудшение наступило на пятый день заболевания – подскочила температура и появились затруднения в дыхании.

Действительно была одышка, не хватало воздуха, приходилось дышать кислородом, все это нарастало. Но, к счастью, плазма сыграла решающую роль. Температура упала, я спал ночь, не захлебываясь. Утром проснулся не то, чтобы здоровым, но я понял, что-то изменилось в хорошую сторону.

Анатолий Спирин, заведующий отделением реабилитации спинальных больных и черепно-мозговой травмы СПб ГБУЗ «Городская больница №40»

Несмотря на строгое соблюдение мер профилактики и постоянную диагностику, заведующая бактериологической лабораторией 40-й больницы Лидия Липская все-таки заболела коронавирусом в августе. Состояние быстро ухудшалось – у женщины появилась отдышка, было тяжело подниматься по лестнице.

Все меры были приняты, меня положили под капельницу, взяли все показания. Понятно, что у меня был интерлейкиновый шторм. У меня был повышен C-реактивный белок – это два признака, на них ориентируются доктора. И мои коллеги сказали, Лидия Викторовна, давайте, мы вам все-таки сделаем плазму.

Лидия Липская, врач-бактериолог высшей категории, заведующая бактериологической лабораторией СПБ ГБУЗ «Городская больница №40»

При введении плазмы в первые (максимум третьи) сутки у человека наблюдается улучшение состояния: уменьшается лихорадка и одышка, снижаются лабораторные показатели, которые отображают проявление цитокинового шторма (неконтролируемое воспаление, которое приводит к повреждению собственных тканей организма).

Получается, что при введении плазмы мы обрываем переход от среднетяжелого течения в тяжелое, замедляем прогрессирование тяжелого течения и даем шанс на выживание пациентам с крайне тяжелым течением КОВИД.

Анна Анисенкова, заведующая инфекционным отделением СПБ ГБУЗ «Городская больница №40»

Плазма крови

После забора донорскую плазму, как правило, замораживают на полгода. По истечению этого срока донора проверяют повторно. В ситуации с коронавирусом счет идет на дни, часы и минуты. Поэтому на станции переливания крови используют другую технологию, так называемую патоген-редукцию. Ее принцип заключается в уничтожении всех теоретически возможных возбудителей гемотрансмиссивных инфекций в конкретном компоненте крови. На выходе получается иммунная плазма, содержащая антитела к SARS-CoV2 в активированном виде.

Попадая в организм реципиента, такие антитела дают немедленную реакцию на вирус – образование иммуноглобулинов. Эти белки изучают молекулы вируса и нейтрализуют их. Таким образом, введенная иммунная плазма не только противодействует вирусу, но и координирует собственные ресурсы организма.

На сегодняшний день мы уже шесть месяцев работаем с антиковидной плазмой. Есть некоторые итоги. В настоящий момент примерно 400 пациентов сдали кровь для производства антиковидной плазмы для нашего стационара, и в нашем стационаре 245 человек получили эту плазму.

Евгений Гарбузов, заведующий отделением анестезиологии и реанимации СПБ ГБУЗ «Городская больница №40»

Доноры плазмы

Одними из первых доноров плазмы были врачи НИИ травматологии и ортопедии имени Вредена, которые оказались в заложниках у вируса в закрытом на карантин институте.

До реанимации, конечно, дело не дошло, но высоченная температура, сумасшедшая слабость, тяжелый грипп, умноженный в 5-6 раз. Почти на 20 дней пропал вкус, пропало обоняние. До сих пор остались многие проблемы с этим связанные.

Евгений Сорокин, донор плазмы крови

После выздоровления у Евгения оказался высокий титр нейтрализующих антител, и он решил помочь пациентам 40-й больницы.

Я поехал на станцию переливания крови на Московском, сдал плазму. Это не составило большого труда, хотя раньше я этого не делал в силу разных обстоятельств. И с тех пор я сдавал ее уже четыре раза.

Евгений Сорокин, донор плазмы крови

Переболевший коронавирусом Павел Коган также сдавал плазму четыре раза. Он на личном примере знает, насколько коварной может оказаться болезнь.

Если рассматривать это во временном промежутке, то ощущение болезни уходило около полутора месяцев. Самым неприятным помимо температуры, потери запаха и вкуса, стало катастрофическое чувство усталости. Такое ощущение, что ты только что вернулся с большого кросса, с большой пробежки. Прогулка из комнаты до кухни по ощущениям воспринималась как хорошая физическая тренировка.

Павел Коган, донор плазмы крови

Чтобы сдать плазму, потенциальному донору необходимо пройти бесплатное обследование на базе Городской больницы №40 Сестрорецка. Получив подтверждение о наличие антител и отсутствия противопоказаний, он может отправиться на станцию переливания крови.

Не надо ничего бояться, надо понимать, что это процедура нередка, это очень популярная процедура за рубежом, и в нашей стране это приобретает все больший охват. Хочется пожелать, чтобы вы понимали и ценили не только свое здоровье, но и пытались помочь окружающим вас людям и тем, кто в этом нуждается.

Павел Коган, донор плазмы крови

Когда все начиналось, никто не верил, что есть какой-то коронавирус, есть какие-то проблемы. Но, пережив это сам, я понял, что это гораздо хуже, чем мы все думаем. И неизвестно, сколько все это продлится, и если у людей есть возможность помочь другим – надо так делать.

Евгений Сорокин, донор плазмы крови

Врачи подчеркивают, что переливание плазмы крови переболевших КОВИД людей может быть эффективно в начале болезни. Процедура помогает пациентам с недостаточностью собственного иммунного ответа и препятствует переходу заболевания в тяжелую форму.

Плазма эффективна на ранних этапах развития заболевания, на 3, 5, 7 сутки от начала клинической картины, когда идет активная репликация вируса, когда пациент высоко лихорадит, когда объем поражения легких еще не достиг критических величин, когда он ограничивается КТ 2, КТ 3. В более поздние сроки развития заболевания эффективность плазмы, к сожалению, значительно снижается. Плазма – это пассивный иммунитет, то есть мы вводим готовые антитела в организм человека, которые и уничтожают вирус.

Евгений Гарбузов, заведующий отделением анестезиологии и реанимации СПБ ГБУЗ «Городская больница №40»

В период сезонного подъема заболеваемости Городская больница №40 остро нуждается в донорской плазме.

В нашем многомиллионном городе при наличии тенденции к увеличению заболеваемости только медики не справятся. Плазму невозможно синтезировать или произвести, как производятся другие фармпрепараты. Ее можно только сдать, поэтому у нас обращение ко всем петербуржцам. Мы с надеждой ждем вашего отклика и участия в процессе сдачи антиковидной плазмы, формирования банка этой плазмы для лечения, в том числе, и жителей Петербурга. Давайте лечить КОВИД вместе.

Анна Анисенкова, заведующая инфекционным отделением СПБ ГБУЗ «Городская больница №40»

Источник

Спасающая жизни: плазма крови

Плазма крови является универсальным лекарственным средством, обладающим выраженными дезинтоксикационными и гемостатическими свойствами. Она выполняет различные функции (питательная, транспортная, буферная и другие)

Плазма крови: «Живая вода»

Плазма крови — жидкое межклеточное вещество (рН 7,34–7,36), в котором во взвешенном состоянии находятся форменные элементы крови. Ее процентное содержание в крови составляет 52–61%.

Согласно существующей гипо-тезе, состав плазмы крови напоминает состав воды доисторических морей, в которых зародилась жизнь. Около 93% плазмы — вода, остальное — белки, липиды, угле-воды, минеральные вещества, гормоны, витамины и др. Основные белки — альбумины, глобулины и фибриноген. Их физиологическая роль поистине многогранна: они поддерживают коллоидно-осмотическое (онкоти-ческое) давление, постоянный объем и рН крови, принимают активное участие в свертывании крови, определяют ее вязкость, играют важную роль в иммунных процессах и служат резервом аминокислот.

Переливание плазмы с гепарином в сочетании с антибиотиками эффективно снижает риск летальных исходов при сепсисе (при условии, что у пациента нет сопутствующих тяжелых заболеваний)

С точки зрения фармакологии, транспортная функция белков плазмы крови имеет особое значение: соединяясь с рядом веществ (холестерин, билирубин и др.), а также с лекарственными средствами (пенициллин, салицилаты и др.), они переносят их к тканям.

Переливая плазму

Массовое исследование вопросов применения плазмы при лечении раненых и больных было проведено во время Великой Отечественной войны. Плазма и сыворотка оказались хорошей заместительной средой, которая не только восстанавливает объем циркулирующей крови (ОЦК), но и удерживает его уровень.

Гибель человека в результате кровопотери до недавнего времени связывали исключительно со снижением обеспе-чения органов тканей кислородом (гипоксией). Терапия кровопотери заключалась в остановке кровотечения и переливании донорской крови или эритроцитной массы «капля за каплю». Однако переливание крови зачастую, напротив, приводило к рецидиву кровотечения.

Английские ученые считают, что периодический анализ циркулирующей в крови опухолевой ДНК создает новую парадигму в изучении эволюции рака. Расшифровав ее последовательность, можно понять, как именно опухоль вырабатывает лекарственную устойчивость и, соответственно, более эффективно ей противостоять

Исследования последних лет показали, что донорские эритроциты должны лишь компенсировать недостаточное снабжение тканей кислородом. Острая массивная кровопотеря ведет не только к снижению кислородообеспечения, но и к глубоким нарушениям системы свертывания крови.

Плазма крови: сегодня и завтра

Плазма устраняет белковый дефицит и повышает онкотическое давление крови, способствуя усилению диуреза и устранению отеков; служит прекрасным дополнением к комплексной терапии инфекционно-токсического шока, печеночной комы, геморраги-ческих синдромов и др.

Продукты переработки плазмы донорской крови — высокотехнологичные современные лечебные препараты, своевременное применение которых спасает жизнь и здоровье многих людей.

Плазма донорской крови — сложная смесь белков (около 500), лечебные свойства многих из которых установлены. Однако срок хранения препаратов крови ограничен, а их производство требует длительного времени. Потребность же в этих препаратах очень высока.

В настоящее время стало возможным получение и применение отдельных белков плазмы, обладающих специфическим дей-ствием, — альбумина, фибриногена, фибрино-лизина (плаз-мина) и др. Активно разрабатываются методы удаления из плазмы (инактивации) вирусов гепатитов, ВИЧ и пр. С помощью генно-инженерных методов ученые трудятся над получением искус-ственно синтезированных белков плазмы крови, что в конечном итоге позволит свести на нет потребность в донорах.

Источник

Плазмотерапия: методики и области применения

Обзор посвящен относительно новому методу регенеративной медицины — плазмотерапии. Приведены патогенетическое обоснование его лечебных эффектов, данные о разных методиках и результаты клинических исследований по изучению эффективности применения плазмотер

The review is devoted to plasmatherapy — a relatively new approach in the regenerative medical practice. Special attention is paid to the description of the pathogenic effects, variety of the modes of its application, as well as the results of clinical studies dedicated to the plasmatherapy effectiveness in various branches of medicine.

Регенеративная медицина — современное динамичное направление в терапии различных патологий, формирующееся на стыке биологии, биоинженерии и практической медицины. Методы регенеративной медицины направлены на стимуляцию процессов восстановления утраченной функции — либо через мобилизацию стволовых клеток самого организма, либо путем введения аллогенного (донорского) клеточного материала. В последнее время большое распространение получил метод плазмотерапии.

Понятие плазмотерапии и ее лечебные эффекты

Плазмотерапией называют использование в лечебных или косметических целях плазмы, полученной из аутологичной крови человека. Получение материала (плазмы) из собственной крови пациента обеспечивает безопасность лечения, так как в этом случае отсутствует опасность инфицирования и мутогенного эффекта.

Существует несколько методик плазмотерапии:

Лечебные эффекты плазмотерапии основываются на высвобождении из тромбоцитов — плоских безъядерных клеток, циркулирующих в кровотоке со сроком жизни 7–10 дней, в концентрации 150–400 тыс/мкл — различных факторов роста (ФР) — гормоноподобных полипептидов с широким спектром биологического действия, способных стимулировать или ингибировать митоз, хемотаксис, дифференцировку клеток. В цитоплазме тромбоцитов содержатся такие структуры, как электронно-плотные тельца, лизосомы и альфа-гранулы, в которых депонируется большое количество ФР, цитокинов, хемокинов и адгезивных белков (фибриноген, фибрин и др.). Основные ФР содержатся в альфа-гранулах и высвобождаются посредством экзоцитоза после активации тромбоцита и действуют локально, не существуя в свободной форме в кровотоке. К настоящему времени известно более 30 ФР; эффекты самых важных из них описаны в табл. 1.

Основными физиологическими активаторами тромбоцитов являются: коллаген (главный белок внеклеточного матрикса), тромбин (сериновая протеиназа, центральный фермент плазменной системы свертывания), АДФ (адениновый нуклеотид, который выделяется из разрушенных клеток сосуда или секретируется плотными гранулами самих тромбоцитов), а также тромбоксан А2 — липид из класса эйкозаноидов, синтезируемый и выделяемый тромбоцитами. Действие каждого из тромбоцитарных активаторов опосредуется через специализированные рецепторы в мембране тромбоцита. В последние годы было установлено, что Са 2+ также играет важную роль в активации тромбоцитов, поэтому для оптимизации высвобождения ФР наиболее часто используют хлорид (иногда глюконат) кальция или собственный тромбин. Активация также может происходить за счет механического или температурного воздействия. Активация плазмы приводит к высвобождению тромбоцитами ФР, а также к полимеризации фибрина, после чего из суспензии PRP образуется гель. Высвобождаемые ФР (естественные полипептиды) воздействуют на клетки-мишени с высокой аффинностью, создавая оптимальную среду для регенерации и репарации тканей. Известно, что лечебный эффект достигается при концентрации тромбоцитов в плазме от 750 тыс. до 1 млн клеток на 1 мкл плазмы.

Плазмолифтинг

При плазмолифтинге (рис. 1) используется способ отделения цельной плазмы, аналогичный таковому при выполнении стандартных лабораторных исследований. Применяются обычные центрифуги и пробирки. Поэтому при приготовлении аутоплазмы клеточные оболочки клеток крови разрушаются, и в результате получается плазма, взвесь клеточных фрагментов и небольшое количество сохранившихся клеток. Лечебный эффект плазмолифтинга зависит от количества сохранных тромбоцитов. Считается, что высокая концентрация тромбоцитов в очаге введения достигается путем увеличения объема инъекционно вводимой плазмы, поэтому в очаге инъекций концентрация тромбоцитов больше, чем в циркулирующей крови. Также технология плазмолифтинга не предусматривает активацию тромбоцитов.

Аутологичная плазма крови, обогащенная тромбоцитарными факторами роста (PRP)

Методика PRP более патогенетически обоснована, так как именно повышенная концентрация тромбоцитов, а не количество введенной плазмы запускает регенеративные способности организма. При PRP-терапии аутоплазма обогащается тромбоцитами за счет применения технологий «мягкого» центрифугирования в специальных пробирках в форме песочных часов.

В зависимости от биохимической структуры, получаемой с помощью различных методик и оборудования, PRP-продукты бывают нескольких видов:

1) PRP (Platelet Rich Plasma) — суспензия;
2) PRG (Platelet Rich Gel) — обогащенный тромбоцитами гель (активированная суспензия, в которой фибриноген преобразуется в фибрин в виде слабо сшитых волокон);
3) PRF (Platelet Rich Fibrin) — обогащенный тромбоцитами фибрин плазмы крови в виде сшитой фибриновой сети высокой плотности;
4) PRFM (Platelet Rich Fibrin Matrix) — представляет собой трехмерный фибриновый матрикс с высокой плотностью и степенью полимеризации фибрина за счет обогащения плазмы не только тромбоцитами, но и фибриногеном, с последующей активацией тромбоцитов. При этом сепарация клеточных компонентов происходит без использования антикоагулянтов.

Плотность препаратов (PRG, PRF) зависит от содержания в них фибриногена во время процесса концентрирования тромбоцитов и биохимической? структуры образующегося фибрина. Формирование же фибриновой сети происходит в результате активации тромбином фибриногена, концентрация которого сильно варьирует в зависимости от метода получения. Волокнистый белок фибрин выступает в качестве временной матрицы, которая обеспечивает поддержку при заживлении раны. Эта матрица способствует фильтрации и пролиферации клеток, то есть схождению краев раны и ее заживлению.

Получение PRP-продуктов

Согласно современной международной классификации, PRP подразделяют на различные разновидности в зависимости не от биохимической структуры, а от содержания тромбоцитов, лейкоцитов и фибрина, поэтому для обозначения различных методов получения PRP определенного состава используются коммерческие названия (табл. 2). Например, сертифицированный на территории Российской Федерации метод Endoret при отсутствии активации in vitro позволяет получить PRP с достаточно высоким содержанием тромбоцитов, низкой плотностью фибрина и отсутствием лейкоцитов. При применении клеточного сепаратора PRP содержание тромбоцитов в конечном продукте больше, чем при применении метода Endoret. При применении систем Vivostat PRF, PRGF Anitua, PRP Nahita тромбоциты в конечном продукте содержатся в малом количестве, лейкоциты отсутствуют, фибрин — низкой плотности. Коммерческие системы по получению L-PRP позволяют получать плазму с высоким содержанием и тромбоцитов, и лейкоцитов, но с низкой плотностью фибрина. Однако к настоящему времени для применения на территории РФ сертифицированы только системы Regen PRP и Ycellbiokit.

На территории США единственным методом, который зарегистрирован и разрешен Управлением по контролю за качеством пищевых продуктов и лекарственных средств (Food and Drug Administration, FDA) к использованию, является Fibrinet PRFM, позволяющий получить фибриновый матрикс, обогащенный тромбоцитами (PRF). Система состоит из двух пробирок. После забора крови и первого центрифугирования, без использования антикоагулянтов к плазме добавляют активатор (хлорид кальция). В результате происходит естественная полимеризация фибрина, с образованием сгустка PRF (обогащенного тромбоцитами фибрина), и высвобождение ФР; в зависимости от содержания лейкоцитов в сгустке выделяют L-PRF или P-PRF. После этого материал переносят в другую пробирку и повторно центрифугируют для образования прочного сгустка в виде трехмерной фибриновой сети — обогащенного тромбоцитами фибринового матрикса (PRFM). Высвобождение ФР происходит в течение 1 часа, потом тромбоциты «встраиваются» в фибриновую сеть, продолжая секретировать биоактивные вещества не менее 7 дней [1–3]. Считается, что такой трехмерный фибриновый матрикс является естественным «носителем» для тромбоцитов и ФР, интегрированных в фибриновую сеть во время полимеризации. PRFM способствует локальному увеличению концентрации ФР в очаге введения [4–6], что в совокупности с длительным секретированием ФР тромбоцитами способствует развитию устойчивого клинического эффекта.

Существуют общие принципы приготовления PRP. На первом этапе получения при центрифугировании кровь разделяется на 3 слоя (рис. 2):

Форма пробирки позволяет выделить PRP без смешения слоев. Далее к материалу добавляют антикоагулянты на основе солей цитрата натрия и раствора глюкозы — с аденином или без — для предотвращения спонтанной активации тромбоцитов, что важно для правильного приготовления PRP. Так как после однократного центрифугирования удается получить плазму с физиологическим (а не увеличенным) содержанием тромбоцитов, необходим второй этап центрифугирования. В зависимости от слоя, который будет отобран, получают чистую PRP (P-PRP) или PRP c лейкоцитами (L-PRP). При приготовлении обогащенной тромбоцитами плазмы (P-PRP) после забора верхнего слоя и верхней части промежуточного слоя материала в другую пробирку, оставшаяся плазма подвергается высокоскоростному центрифугированию, после чего клеточный осадок с большой концентрацией тромбоцитов (1/3 от получившегося продукта) повторно суспендируют. При заборе полностью верхнего и промежуточного слоев и последующем центрифугировании также получается клеточный осадок, но состоящий уже не только из тромбоцитов, но также и из лейкоцитов и небольшого количества эритроцитов, встречающихся в промежуточном слое; этот продукт и представляет собой плазму, обогащенную тромбоцитами и лейкоцитами: L-PRP. Активация P-PRP- и L-PRP-суспензий и преобразование их в гель отложена и происходит после контакта с тканями организма. Поэтому их иногда относят к «неактивированным» продуктам, имея в виду, что не происходит активации in vitro [7]. При добавлении активатора в пробирку после второго центрифугирования образуются P-PRP и L-PRP фибриновые гели, считающиеся активированными продуктами. Необходимо учитывать, что лейкоциты также высвобождают матриксные металлопротеиназы, например, коллагеназу и эластазу — цинк-зависимые протеолитические ферменты, способные разрушать компоненты межклеточного матрикса. Матриксные металлопротеиназы также участвуют в активации и деактивации хемокинов и цитокинов.

Области применения плазмотерапии

Плазмотерапия с успехом применяется в различных областях медицины. В травматологии PRP применяется при лечении артрозов, артритов, эпикондилитов, субакромиального синдрома, плантарного фасциита («пяточных шпор»); при этом реализуется спазмолитический эффект, восстанавливаются объем и состав суставной жидкости, активируется кровообращение в области пораженного сустава, укрепляются связки и мышцы, окружающие больной сустав. G. Bosh и соавт. в эксперименте с травмами сухожилий у лошадей исследовали влияние PRP на неоваскуляризацию и показали, что PRP способствует ангиогенезу [8].

В стоматологии метод плазмолифтинга успешно применяется для лечения воспалительных заболеваний — гингивитов, парадонтитов и др., а также при операциях удаления зубов и имплантациях. Уже через несколько процедур можно увидеть положительную динамику от лечения в виде улучшения показателей гигиенических и пародонтологических индексов, снижения кровоточивости десен [9, 10].

В 2016 г. на базе Сеченовского университета была доказана эффективность и безопасность применения аутологичной плазмы крови, обогащенной тромбоцитарными факторами роста для лечения эректильной дисфункции [11, 12]. В 2017 г. совместно с виварным экспериментальным комплексом МГУ им. М. В. Ломоносова начат доклинический эксперимент на крысах в области репродуктологии — оценка безопасности и эффективности применения PRP в различных модификациях для лечения мужского бесплодия [13.

Благодаря противовоспалительному, анальгетическому, противо­отечному и гемостатическому эффектам PRP, сопоставимым с эффектом кортикостероидной терапии, данный метод нашел широкое применение в хирургии [14]. Способность запускать ангиогенез открывает новые возможности в кардиохирургии при введении PRP в очаги ишемизации у пациентов с инфарктом миокарда [15]. В офтальмологии PRP используют при лечении язв роговицы — показано, что аутоплазма, обогащенная тромбоцитами, способствует уменьшению воспаления, боли и субъективных ощущений [16]. Доказана эффективность PRP в составе комплексного лечения хронических заболеваний органов малого таза, сальпингоофоритов, эндометритов в гинекологии [17]. В 2017 г. B. Hersant и соавт. высказали положительное мнение о возможности применения PRP в микрохирургии [18].

Но, пожалуй, активнее всего аутологичная плазма крови, обогащенная тромбоцитарными ФР, используется в пластической хирургии, дерматологии и косметологии, так как очевидно, что ФР, цитокины и другие биологически активные вещества способны оказывать нормализующее влияние на процессы репарации и регенерации тканей. Поскольку ФР могут воздействовать на стволовые клетки в области фолликула волоса, стимулируя развитие новых фолликулов, способствуют неоваскуляризации и пролонгируют фазу анагеновой фазы роста волоса (период интенсивного деления клеток волосяного фолликула), PRP активно используется в трихологии. A. Trink с соавт. провели рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование на 45 пациентах по оценке безопасности и эффективности PRP при лечении очаговой алопеции [19]. Разным группам пациентов применяли либо аутоплазму, обогащенную тромбоцитарными факторами роста, либо триамцинолон ацетонид (ТА), либо плацебо. Каждая процедура выполнялась однократно раз в месяц — всего в течение 3 месяцев. У пациентов, кому вводили PRP, по данным дермоскопии значительно увеличился рост волос по сравнению с двумя остальными группами, при этом маркер пролиферации клеток Ki-67 у них был значительно выше, чем у остальных. Экспрессия ядерного антигена Ki-67 указывает на клетки, находящиеся в активной фазе клеточного цикла, то есть стремительно делящиеся. Также в группе больных, получавших PRP, полная ремиссия в течение 12 месяцев выявлена у 27 пациентов, в то время как при лечении ТА — у 12 пациентов. В последующие 6 месяцев в группе больных, получавших ТА, рецидив выпадения волос наблюдался у 17 больных, а в группе PRP — ни у одного из пациентов. Еще через 12 месяцев рецидив при лечении ТА обнаружен у 32 пациентов, а при лечении аутоплазмой лишь у 14 пациентов.

J. Donavan в 2015 г. опубликовал данные о случае успешного лечения офиазиса с использованием PRP. Эта форма гнездной алопеции характеризуется появлением очагов облысения в области затылка (или, иногда, в лобной области), которые, сливаясь, в виде ленты распространяются в сторону ушных раковин, достигая висков. Очень часто офиазис характеризуется торпидностью к проводимой терапии. В наблюдении J. Donavan длительность заболевания составила более 10 лет (рис. 3), заболевание было резистентно к лечению кортикостероидными препаратами и миноксидилу. При проведении PRP-терапии положительный эффект наблюдался уже после первой процедуры. PRP вводили однократно в месяц, всего 3 инъекции на курс лечения. Через 3 месяца длина волоса у пациентки составила 2,8 см. Авторы считают, что PRP может эффективно использоваться при лечении стероид-резистентных форм очаговой алопеции или при непереносимости стероидных препаратов [20].

В 2016 г. Thamer Mubki с соавт. также провели исследование эффективности PRP в лечении очаговой алопеции у пациентки с длительностью заболевания более 5 лет, которой проводилось лечение 0,05% клобетазола пропионатом, 2% миноксидилом, 2% кремом антралина. Эффективность данной терапии была признана недостаточной, так как был отмечен лишь частичный рост волос, в связи с чем пациентке был проведен курс лечения PRP и ТА на правую половину волосистой части головы; при этом на левую половину наносили только ТА. На правую половину волосистой части головы всего было проведено 8 процедур в течение 16 недель: по 4 инъекции PRP и ТА, на левую — только 4 инъекции ТА. Данные цифровой трихоскопии показали, что при использовании PRP и ТА увеличение количества волос составило 16% от исходных данных. Лечение ТА дало результат 12%. Однако при этом на правой половине головы (где применялись PRP и ТА) было отмечено увеличение среднего диаметра волоса на 35%, а на левой половине головы (лечение только ТА) — наоборот было отмечено уменьшение диаметра волоса. Таким образом, было констатировано, что лечение с применением аутоплазмы, обогащенной тромбоцитарными факторами роста, в комплексе с ТА дало лучшие результаты в лечении очаговой алопеции, чем терапия только стероидными препаратами (ТА) [21]. Также положительная динамика от терапии PRP отмечена при лечении андрогенной алопеции (АГА) в исследовании V. Cervelli и соавт. [22]. Было отмечено, что аутоплазма, обогащенная тромбоцитарными ФР, увеличивала транскрипционную активность β-катенина, являющегося белком сигнального пути Wnt, который определяет различные направления дифференцировки клеток. Также PRP увеличивала уровень антиапоптотических белков BCL-2, защищая клетки от апоптоза. Активация Akt- и ERK-сигнальных путей стимулирует перемещение β-катенина в ядро, обуславливая пролиферацию и дифференцировку клеток. Кроме того, PRP увеличивала экспрессию факторов роста фибробластов (ФРФ). Было обнаружено, что при лечении АГА особенно увеличивался уровень ФРФ-7, также известного как фактор роста кератиноцитов, который продлевал фазу анагена в цикле роста волос. Механизмы действия PRP при АГА описаны в табл. 3.

Метаанализ, проведенный в 2017 г. Salvatore Giordano и соавт., касательно применения PRP при лечении АГА показал, что данный метод клеточной терапии увеличивает количество волос, их структура становится толще при том, что побочные эффекты от малоинвазивной процедуры PRP минимальны [23]. Однако к настоящему времени еще не предложены конкретные стандартизированные протоколы приготовления PRP и лечения АГА аутоплазмой, обогащенной тромбоцитарными ФР.

Фото- и хроностарение кожи представляют собой полиэтиологические биологические процессы, при которых происходят изменения гомеостаза коллагена, основного структурного компонента кожи. Это приводит к нарушению опорного каркаса кожи, изменению ее морфологических свойств, формированию морщин. Источником коллагена являются фибробласты, которые помимо этого структурного белка вырабатывают практически все компоненты межклеточного матрикса дермы. Кроме того, они контролируют взаимодействие между кератиноцитами, эндотелиоцитами и обеспечивают гомеостаз и морфофункциональную организацию кожи [24]. Так как биоактивные вещества, вырабатываемые PRP, индуцируют пролиферативную и синтетическую активность фибробластов дермы, этот метод позволяет эффективно проводить коррекцию возрастных изменений кожи [25].

A. Redaelli с соавт. проводилась оценка эффективности применения PRP для коррекции морщин в области лица и шеи, а также рубцовых изменений кожи при постакне [26]. Под наблюдением в течение 3 месяцев было 23 пациента; контроль эффективности лечения проводился при помощи дерматоскопии и фотодокументирования. Был сделан вывод, что использование аутоплазмы, обогащенной тромбоцитами, приводит к улучшению текстуры кожи лица и шеи, уменьшению выраженности мелких морщин, выравниванию тона кожи и увеличению ее эластичности.

А. Sclafani проводил исследования по использованию обогащенного тромбоцитами фибринового матрикса PRFM с целью коррекции мелких, средних и глубоких морщин, а также субцизией рубцовой ткани [3, 5, 6]. Результаты показали визуально заметное уменьшение глубины морщин [3]. В другом проведенном исследовании А. Sclafani продемонстрировал выраженное уменьшение носогубных складок после 1 процедуры введения PRFM. Улучшение состояния кожи отмечалось через 2 недели после проведения инъекции, а эффект сохранялся более 10 недель [5]. По шкале оценке морщин WAS (Wrinkle Assessment Scale) средний показатель снизился на 2,12 ± 0,56 через 1 неделю. После 2, 6, и 12 недель показатель снижался на 0,97 ± 0,75, 1,08 ± 0,59 и 1,13 ± 0,72 соответственно.

Cabrera-Ramírez и соавт. в проведенном в 2017 г. исследовании приводят данные об уменьшении процессов фотостарения кожи рук при проведении процедуры PRP. Для определения результата была произведена биопсия кожи с дорсальной поверхности руки с целью проведения гистологического исследования. Данные показали увеличение числа фибробластов и коллагена, активацию ангиогенеза, что способствовало уменьшению проявлений старения кожи, количества морщин, снижению эластоза [27].

Н. В. Просянникова и соавт. доказали эффективность применения аутоплазмы, обогащенной тромбоцитарными ФР, в лечении хронических язвенных дефектов кожи, образовавшихся вследствие хронической венозной недостаточности или диабетической ангиопатии [28]. PRP оказала значительный эффект на длительно незаживающие раны в виде улучшения процессов регенерации, ускорения заживления дефектов. Гистологическая структура кожи стала более организованной и определенной, появились отчетливые признаки эпителизации. По данным бактериологического исследования снижался уровень микробной обсемененности. Авторы полагают, что PRP приводит к активизации местного иммунитета в ране, скорее всего, посредством привлечения в патологический очаг иммунных клеток. Тем не менее данная гипотеза требует дальнейшего исследования.

И. В. Фирсова и соавт. оценили эффективность PRP-терапии при эрозивно-язвенной форме красного плоского лишая слизистой оболочки полости рта [29]. В исследовании пациенты были разделены на две группы: в первой проводилась общепринятая медикаментозная терапия; во второй дополнительно применялась аутоплазма, обогащенная тромбоцитами. У пациентов второй группы уже через неделю была отмечена положительная динамика в виде улучшения показателей гигиенических и пародонтологических индексов, снижения размеров площади очагового поражения, активации эпителизации, исчезновения гиперемии и отечности слизистой оболочки, приобретения папулезным рисунком бледно-сероватого цвета. Данные цитологического исследования показали появление незрелых и зрелых форм метаплазированных клеток, что свидетельствует о повышении активности процесса регенерации эпителия. Также наблюдалось уменьшение количества нейтрофилов и кокковой микрофлоры, уменьшение признаков дегенеративных изменений в эпителиоцитах, а в последующем — более ранее увеличение количества эпителиальных клеток в сравнении с пациентами первой группы. При применении PRP процесс нормализации состояния эпителия слизистой оболочки рта в области очагов поражения протекал в более короткие сроки.

F. Casabona и соавт. (2017) полагают, что локальные инъекции PRP оказывают положительный терапевтический эффект при лечении склеротического лихена полового члена [30]. Они считают, что препаратами первой линии все же остаются кортикостероиды, однако аутоплазма, обогащенная тромбоцитарными ФР, способствует регенерации в местах рубцевания, уменьшает симптоматику и улучшает качество жизни. Необходимы дальнейшие исследования для оценки долгосрочных результатов.

Также описано применение различных терапевтических комбинаций плазмотерапии с другими лечебными факторами.

S. Tenna и соавт. в 2017 г. показали, что комбинация PRP с аутологичной жировой трансплантацией «Nano Fat grafting» совместно или по отдельности с лазерной шлифовкой может быть эффективна при коррекции атрофических рубцов после угревой болезни [32, 33]. Nano Fat grafting (микролипофилинг) представляет собой процедуру, при которой полученный аутологичный липоаспират проходит несколько этапов эмульгирования и фильтрации, а затем микроинъекционно вводится в корректируемые области. Как правило, зонами-донорами становятся колени и внутренняя поверхность бедра. В полученном образце практически отсутствуют зрелые адипоциты, однако имеется большое количество мезенхимальных стволовых клеток. Данная жидкая суспензия может быть введена в разные подкожные слои через тонкие иглы (27 G), такие же, как и при инъекции гиалуроновой кислоты, ботокса или инсулина [34]. Высвобождаемые факторы роста PRP при комбинированной терапии приводят к лучшему усвоению мезенхимальных стволовых клеток, увеличению пролиферации клеток и их дифференцировке. Результаты ряда клинических исследований показывают, что терапия методом микролипофилинга совместно с PRP приводила к увеличению толщины эпидермиса, усилению пролиферации фибробластов, увеличению синтеза коллагена [35–37]. Такая комбинированная терапия используется и при лечении хронических язв нижних конечностей [35].

M. Asif и соавт. изучали эффективность и безопасность применения PRP совместно с микроигольной терапией (Microneedling) для лечения рубцовых изменений после угревой болезни [38]. Принцип Microneedling заключается в инициировании синтеза коллагена. Это достигается за счет микроповреждений дермы с использованием микроигл — настолько тонких, что повреждение ткани незначительно, однако такое воздействие через «нервный стимул» активирует процесс заживления. При этом происходит высвобождение ФР, которые способствуют миграции фибробластов в очаг воздействия и стимуляции эндотелиальных клеток, что промотирует неоангиогенез. Кроме того, высвобождаемые из PRP ФР дополнительно стимулируют продукцию коллагена, запускают клеточную дифференцировку, а также оказывают противовоспалительный и антибактериальный эффект. Антибактериальное действие обеспечивается наличием в плазме антимикробных пептидов (фибринопептид A, фибринопептид B, тимозин b-4, основной белок тромбоцитов, активирующий соединительную ткань 3 пептид, RANTES, 4 фактор тромбоцитов) и содержащихся в L-PRP и L-PRF лейкоцитов, что оказывает прямой и опосредованный эффект за счет антиген-специфичных иммунных реакций. Данные эффекты дополнительно обуславливают эффективность комбинации PRP с травматизацией микроиглами [39, 40].

Совместное применение PRP c лазерной шлифовкой CO₂-фракционным лазером описано в исследовании J.-I. Na и соавт. [41]. Лазерная шлифовка CO₂-фракционным лазером часто используется с целью устранения морщин на лице. Однако нередко встречаются такие осложнения, как рубцевание и длительная эритема. В исследовании 25 пациентам была выполнена процедура с применением абляционного СО₂-лазера на внутренние поверхности обеих рук для разглаживания морщин. После обработки лазером на одну руку местно наносили активированную хлоридом кальция PRP; поверхность кожи второй руки использовалась в качестве контроля. Исследование показало, что комбинация лазерной шлифовки СО₂-фракционным лазером и PRP приводит к уменьшению выраженности побочных явлений от воздействия лазером (гиперпигментации, возникающей как следствие длительного воспалительного процесса, сопровождающегося выраженной эритемой). При гистологическом анализе, проведенном через месяц после процедуры, в срезах кожи, обработанных PRP, наблюдается большая толщина эпидермиса, более организованный роговой слой и толстые пучки коллагеновых волокон по сравнению с контрольными образцами. M. Shin и соавт. в аналогичном исследовании применяли комбинацию неабляционной лазерной шлифовки CO₂-фракционным лазером и PRP с целью устранения морщин [42]. В результате в местах проведения комбинированной терапии наблюдалось большее количество фибробластов и большая плотность коллагена, чем в участках применения только лишь СО₂-фракционного лазера. Также отмечены более высокие показатели эластичности кожи и, соответственно, выраженности моделирующего эффекта. Однако механизм действия PRP при применении ее после лазеротерапии до конца не изучен. Предполагают, что основную роль играют проангиогенные факторы, индуцирующие ангиогенез и регулирующие образование кровеносных сосудов, которые повреждаются под действием лазера [43]. Очевидно, что описанные лечебные комбинации при совместном применении оказывают синергическое действие, приводящее к более выраженному эффекту, чем достигаемый при использовании каждой из методик по отдельности.

Описано сочетание плазмолифтинга с введением ботулотоксина типа А [17]. По мнению Р. Р. Ахмерова, комбинация этих инъекций позволяет одновременно разгладить мимические морщины и улучшить качество кожи. Вместе с тем аутоплазма может быть полезна при коррекции побочных эффектов от избыточного введения ботулотоксина А (например, в виде опущения верхнего века), так как ее введение способствует улучшению кровоснабжения ткани и ускорению реиннервации. Также показана эффективность комбинации плазмолифтинга с контурной пластикой, филлерами на основе гиалуроновой кислоты, мезотерапией, биоревитализацией, интралипотерапией, химическими пилингами, нитевым лифтингом [17, 44].

Выводы

Таким образом, плазмотерапия представляет собой динамично развивающийся метод клеточной терапии, саногенетические эффекты которого востребованы в различных областях медицины. Наиболее активно происходит внедрение данной технологии в дерматовенерологию и косметологию, причем лечение плазмой все чаще применяется в качестве монотерапии. Однако метод остается все еще недостаточно полно изученным, к настоящему времени пока не накоплены достаточные статистические данные о результатах его применения и, соответственно, отсутствуют стандартизированные лечебные протоколы. Таким образом, дальнейшим направлением научного поиска в этой области является проведение полноценных долгосрочных двойных слепых рандомизированных плацебо-контролируемых исследований полезных свойств аутоплазмы, реализуемых посредством применения различных лечебных методик.

Литература

* ФГБОУ ДПО РМАНПО МЗ РФ, Москва
** ФГБОУ ВО Первый МГМУ им. И. М. Сеченова МЗ РФ, Москва
*** ФГБОУ ВО РНИМУ, Москва

Плазмотерапия: методики и области применения/ И. В. Кошелева, Л. И. Шадыжева, Н. О. Переверзина, Н. А. Кливитская

Для цитирования: Лечащий врач № 1/2018; Номера страниц в выпуске: 59-66

Теги: косметолория, регенеративная медицина, плазма крови

Источник